Domuz Akut İshal Sendromu Coronavirüsü (SADS-CoV), yeni doğan domuz yavrularında sulu ishale neden olabilen ve domuz endüstrisinde önemli ekonomik kayıplara neden olabilen, yeni keşfedilen domuz enterik patojenik bir koronavirüstür.Şu anda, SADS-CoV enfeksiyonunun ve aşısının etkinliğini değerlendirmek için uygun bir serolojik yöntem yoktur, bu nedenle bu eksikliği telafi etmek için etkili bir enzim bağlantılı immünosorbent testinin (ELISA) kullanılmasına acilen ihtiyaç vardır.Burada, insan IgG Fc alanı ile kaynaşmış SADS-CoV başak (S) proteinini eksprese eden bir rekombinant plazmit, rekombinant bakülovirüs üretmek için yapılandırıldı ve HEK 293F hücrelerinde eksprese edildi.S-Fc proteini, protein G reçinesi ile saflaştırılır ve anti-insan Fc ve anti-SADS-CoV antikorları ile reaktivitesini korur.Daha sonra dolaylı ELISA (S-iELISA) geliştirmek ve S-iELISA'nın reaksiyon koşullarını optimize etmek için S-Fc proteini kullanıldı.Sonuç olarak, immünofloresan tahlili (IFA) ve Western blot ile teyit edilen 40 SADS-CoV negatif serumun OD450nm değeri analiz edilerek cut-off değeri 0.3711 olarak belirlendi.S-iELISA çalışmaları içindeki ve arasındaki 6 SADS-CoV pozitif serumun varyasyon katsayısı (CV) %10'dan azdı.Çapraz reaktivite testi, S-iELISA'nın diğer domuz virüsü serumları ile çapraz reaktiviteye sahip olmadığını gösterdi.Ayrıca, 111 klinik serum örneğinin saptanmasına dayalı olarak, IFA ve S-iELISA'nın genel çakışma oranı %97,3'tür.Serumun 7 farklı OD450nm değeri ile virüs nötralizasyon testi, S-iELISA ile tespit edilen OD450nm değerinin virüs nötralizasyon testi ile pozitif korelasyon gösterdiğini göstermiştir.Son olarak, 300 domuz çiftliği serum örneğinde S-iELISA yapıldı.Diğer domuz enterovirüslerinin ticari kitleri, SADS-CoV, TGEV, PDCoV ve PEDV'nin IgG pozitif oranlarının sırasıyla %81.7, %54 ve %65.3 olduğunu göstermiştir., %6, sırasıyla.Sonuçlar, S-iELISA'nın spesifik, hassas ve tekrarlanabilir olduğunu ve domuz endüstrisinde SADS-CoV enfeksiyonunu tespit etmek için kullanılabileceğini göstermektedir.Bu makale telif hakkı ile korunmaktadır.tüm hakları Saklıdır.
Gönderim zamanı: Haziran-22-2021